Go to Top

Radiobiologie

Domenii de interes

Toxicologie

Toxicologie

Micronucleaţia ca biomarker genotoxic  – Testul micronucleilor

  1. Efectele genotoxice ale radiatiilor ionizante la personalul expus profesional (angajatii Centralei Nucleare Cernavoda)
  2.  Efectele genotoxice ale chimicalelor – Testul B12 Mutagenicitatea – Testul in vivo pe eritrocite de mamifere

Efectele genotoxice ale chimicalelor la nivelul ficatului -Testul B39 Testul in vivo de sinteza neprogramata a ADN (UDS) pe celule hepatice de mamifere; identidficarea substantelor care pot induce repararea AND in celulele hepatice ale animalelor tratate.

Efectele citotoxice ale xenobioticelor – evaluare multiparametrica in vivo, utilizand cellule primare si linii celulare

Detectia urmelor de metale grele si a altor microelemente in probele biologice utilizand spectrometria de masa de tip ICP-MS

 

Drug discovery

Drug

Patologie
Studii paraclinice pentru individualizare a terapiei in artrita reumatoida (leflunomide, metotrexat si agenti biologici)
– genotipul HLA in relatie cu raspunsul pacientului la terapie
– corelatia cantitativă intre structură si activitate (QSAR) pentru medicamente antireumatice
– dinamica raspunsului imun umoral si celular in cursul terapiei

Biologie celulara

  1. Stresul oxidativ in cancer si boli autoimmune
  2. Neuro-imunologie – inter-relatia sistem opioid-sistem imun in conditii normale si patologice
  3. Celule interstitiale Cajal-like în miometrul uman ; caveole miometriale şi implicarea lor în contracţia uterina

Descriere

Laboratorul a fost structurat pe cadrul fostului Laborator de Genetica (Eredopatologie), condus de-a lungul timpului de : Dr. Antohi Stefan, Dr. Caratzali Alexandru, Dr. Albu Aurel, Dr. Stefanescu Dragos, Dr. Lenghel Zoltan. Respectând interesele ştiinţifice în direcţia tradiţiei Institutului “Victor Babeş”, echipa noastră şi-a expandat cercetarea în noi arii în ultimii 15 ani. Efortul major al laboratorului nostru a fost focusat pe mai multe domenii incluzând:

  1. impactul la nivel nuclear al noxelor oncogene în carcinogeneza chimică experimentală şi modularea răspunsului celular via hormoni şi agenţi antioxidanţi;
  2. crearea unui model original pentru contracţia musculară a muşchiului striat (contribuţii teoretice);
  3. mecanisme implicate în transportul prin membrane (principiul original numit “zone melting”);
  4. contracţia neuromediată a ţesutului muscular vascular;
  5. interacţia radiaţiilor (laser, neutroni, particule gamma) cu cromatina în ţesut normal şi tumoral în modele experimentale;
  6. micronucleatia in vivo şi in vitro ca biomarker al genotoxicităţii;
  7. teste de mutagenicitate în toxicologie;
  8. frecvenţa ICC-like în miometrul uman
  9. studiul caveolelor şi implicaţiile acestora în contracţia miometrică
  10. determinarea de urme de elemente chimice in tesuturi prin spectrometrie de masa ICP-MS

Metode folosite curent includ: markeri radiosotopici, autoradiografici, UV, VIS spectrofotometrici, microscopie optică, PFGE (CHEF III), culturi celulare. Interesele curente în cercetare se focusează în două direcţii:

  1. Studiul proceselor biologice la nivel molecular inplicând structuri nucleare, folosind metode moderne de spectrometrie de masa ICP –MS, RT-PCR, UV-VIS spectrofotometrice şi scintilaţie spectrometrică.
  2. Aplicaţii comercialeale următoarelor teste:
    1. Testul Guthrie pentru screeningul fenilcetonuriei
    2. Testul Micronucleilor
    3. Testul Ames
    4. Analiza citogenetică (în colaborare).

Perspective

1. Evaluarea riscului biologic asociat radiatiei ionizante (doze inalte si joase), utilizand noile abordari celulare, proteomice si genomice:

  1. mecanisme celulare si biomarkeri asociati efectelor timpurii ale radiatiei ionizante
  2. radioterapia in boli neoplazice:
      1. identificarea markerilor de sensibilitate la iradiere
      2. noi aspecte privind efectul radiatiei ionizante asupra raspunsului imun

Metode de investigatie

      1. evaluarea profilului proteic in ser utilizand spectrometria de masa (SELDI-TOF-MS)
      2. retele de transmitere intracelulara a semnalelor de viata si moarte celulara (multiplexare proteica utilizand tehnologia xMAP array)
      3. profilul transcriptiei genice (gene microarray)

2. Studiul traficului substantelor la nivel celular, utilizand specii marcate cu izotopi radioactivi – aplicatii in farmacologie (in colaborare cu IFIN “Horia Hulubei”)
3. Studii in vitro privind toxicitatea si mecanismul de actiune al radiofarmaceuticelor (in colaborare cu IFIN “Horia Hulubei”)

Unitatea Nucleara

Unitatea nucleara este autorizata de Comisia Nationala pentru Controlul Activitatilor Nucleare (CNCAN) pentru lucrul cu surse nucleare deschise:

  • categoria de risc radiologic 2 (I131, I125, Cr51, P32 cu activitati max. 185 MBq si H3 cu activitate max. 370 MBq)
  • categoria de amenajare II

Personal

Dr. fiz. Gina Manda, Şef Laborator Radiobiologie CSII,
Vasile Preoteasa,Şef Unitate Nucleară, Biofizician,CSIII
Neagoe Ionela,Asistent cercetare
Daniela Geogia,Asistent medical
Sanda Sima,Laborant
Checherita Alexandru
Mocanu Mihaela Andreea

Activitatea Laboratorului Radiobiologie

Proiecte de cercetare in derulare

  1. Proiect PNCDI 2 nr. 61-018/2007

Noi analogi nucleozidici potential activi pentru terapia cancerului – de la sinteza la tinte celulare si moleculare (CYTOMOL),

Rezumatul fazei 2 a contractului 61-018

Rezumatul etapei 3 a contractului 61-018

Rezumatul etapei 3 a contractului 61-018 – credite de angajament
Coordonator: INCD “Victor Babes”
Director de proiect: CSII Dr. Gina Manda

  1. Proiect nucleu PN09_33_416/2009 (in cadrul Programului nucleu PN09_33 “Medicina translationala”)

Determinarea ponderii acumularii de microelemente la soareci transgenici prin spectrometrie de masa
Responsabil: CSIII Vasile Preoteasa

  1. Proiect PNCDI 2 nr. 61-037/2007

Dezvoltarea unui sistem bioinformatic de tip QSAR de modelare a activitatii agentilor terapeutici antitumorali si antireumatici in terapii individualizate (BIOINFOQSAR)
(http://www.univermed-cdgm.ro/?pid=1471)
Coordonator: UMF Carol Davila, director de proiect: Conf. Dr. Lacramioara Popa
Partener: INCD Victor Babes, responsabil proiect CSII Dr. Gina Manda

  1. Proiect PNCDI 2 nr. 42-152/2008

Dezvoltarea unor metode inovastoare de cercetare a mecanismelor de actiune si de evaluare precoce a toxicitatii terapiilor imunosupresoare in unel boli reumatice autoimune
Coordonator: UMF Carol Davila, director de proiect: Conf. Dr. Andra Balanescu
Partener: INCD Victor Babes, responsabil proiect CSII Dr. Gina Manda

  1. Proiect PNCDI 2 nr. 52-122/2008

Asigurarea securitatii si calitatii resurselor furajere si produselor animaliere prin solutii nutritionale de diminuare a efectelor negative ale unor micotoxine, contaminanti naturali ai hranei animalelor de ferma si omului
Coordonator: INCD de Biologie si Nutritie Animala, director de proiect: CSII Dr. Ionelia Taranu
Partener: INCD Victor Babes, responsabil proiect CSII Dr. Gina Manda

Prestari servicii medicale

  1. Test de screening neonatal PKU (Testul Guthrie pentru depistarea fenilcetonuriei), realizat pentru Institutul de Ocrotire a Mamei si Copilului)
  1. Bateria Guthrie este produsa in cadrul Unitati de productie din laboratorul Radiobiologie
  1. Teste de determinare a toxicitatii chimicalelor (in colaborare cu Biobaza):
  1. testul B12 (mutagenitate-testul in vivo de micronucleu pe eritrocite de mamifere)
  2. testul B39 (testul in vivo de sinteza neprogramata a ADN pe celule hepatice de mamifere)
  1. Determinari de microelemente in probe de sange prin spectrometrie de masa de tip ICP-MS (ppm-ppq)
  2. Masuratori de radioactivitate beta si gamma (Unitatea nucleara din laboratorul Radiobiologie)
  3. Sterilizare pe cale umeda si uscata (sticlarie, instrumentar medical etc.)
  4. Neutralizare ecologica (cu microunde) a deseurilor medicale infectioase (inclusiv virus hepatic, HIV, polio, antrax, paraziti, fungi)

Metode experimentale
Biologie celulara

  1. culturi celulare – celule primare si linii celulare (limfoblasti T din linia Jurkat, blasti monocitari din linia U937, celule de carcinoma de colon Caco-2, celule de carcinoma de san din linia MCF-7, celule endoteliale din linia HUVEC, osteoblasti din linia HOb etc.)
  2. evaluarea complexa a citotoxicitatii chimicalelor, inclusiv a medicamentelor anti-canceroase
      1. determinarea viabilitatii celulare in corelatie cu integritatea membranara: testul reducerii sarurilor de tetrazoliu (MTS), testul eliberarii LDH
      2. apoptoza celulara: testul anexina V-iodura de propidiu (citometrie in flux)
      3. proliferarea celulara: testul reducerii sarurilor de tetrazoliu, testul incorporarii timidinei tritiate, citometrie in flux utilizand colorantul CFDA-SE
      4. sinteza ARN: testul incorporarii uridinei tritiate
  3. evaluarea ex vivo a raspunsului imun
      1. izolarea celulelor mononucleare din sange si din fluid sinovial
      2. determinarea capacitatii de activare timpurie si tarzie a limfocitelor (exprimarea CD69 si respectiv CD25 – citometrie in flux)
      3.  determinarea capacitatii proliferative a limfocitelor activate experimental cu mitogeni lectinici specifici pentru limfocitele T si B
      4. evaluarea profilul citokinelor si al chemokinelor in ser si fluid sinovial: multiplexare proteica, utilizand tehnologia xMAP array
      5. determinarea activitatii microbicide dependente de oxigen a monocitelor si granulocitelor activate exeprimental cu stimuli fiziologici (bacterii, peptide N-formilate, activatori ai protein kinazei C): citometrie in flux cu dihidrorodamina 123, testul reducerii NBT
      6. evaluarea factorilor anti-oxidanti din ser si lizate celulare

Toxicologie in vivo

  1. Teste de mutagenicitate (realizate in colaborare cu biobaza)
  2. Testul B12 Mutagenicitatea – Testul in vivo pe eritrocite de mamifere.
  3. Testul B39 Testul in vivo de sinteza neprogramata a ADN (UDS) pe celule hepatice de mamifere
  4. Determinarea urmelor de metale grele in probe biologice – spectrometrie de masa de tip ICP-MS (inductively coupled plasma-mass spectrometry).

 Publicatii

 

Lucrări recente

  • Antioxidants And Their Implication In Malignity Antioxidant Effects On Walker Tumor Genome [abstract – ppt file]
  • Selenium And Vitamin E Modulatory Effects On Genomic Dna Double-Strand Breaks Induced By Chemical Carcinogens In Acute Treatment In Wistar Rats [abstract – ppt file]
  • Biophysical Methods Analysis On Chromatin; Fast Neutrons Protection Of Chromatin By Cs+ And Al3+ Ions, Analyzed By Static Spectrofluorimetry And Time Resolved Spectroscopy [abstract – ppt file]
  • Effect of Radioprotective Agent On Chromatin Radiolysis [abstract – ppt file]
  • Micronucleation As Genotoxic Biomarker; Micronucleation Incidence In Professionally Exposed Subjects To Ionizing Radiations In Correlation With Smoking [abstract – ppt file]
  • Icc-Like In Human Myometrium [abstract – ppt file]
  • Myometrial Caveolae And Their Implication In Uterine Contraction [abstract – ppt file]

Participări la congrese internaţionale

  1. “Micronucleus Test Applied In Patients With Acute Leukemia” Daria Mihalache, D.T.Stefanescu, L. Constantiniu 8th Intern Congress Of Human Genetics, Washington, U.S.A.,Abst.1344.1991
  2. “Cellular Water Alterations In Rat Liver Exposed To Oncogenic Stress. A Relaxometry Study” Daria Mihalache, Carmen Burtea, Brandusa Ungureanu 13th Ann. Meeting Euro. Soc. Nmr In Medicine And Biology, Bruxelles, Belgium, Abstr. 473, 1997
  3. “3h-Cholesterol As Biomarker In The Rat Liver Tissue And Plasma Cholesterol Level After Exposure To An Oncogenic Agent. Modulation By Vitamin D3 And E”. Daria Mihalache, A. Costache, Brandusa Ungureanu 11th Balkan Biochem Biophys. Days, Thessaloniki, Greece, Abstr. 315, 1997
  4. “The Ionic Theory On Muscular Contraction” C.T.Dragomir, Daria Mihalache, Irina Radulescu Congres De Myologie, Nice, France, Abstr.127, 2000
  5. “Serum And Cellular Cholesterol Dynamics In Wistar Rat With Querin Tumour” Daria Mihalache,A.Costache, V.Preoteasa 18th Ann. Ses. Of Romanian Society Of Cell And Molec. Biol., Iasi.Abst.27,2000
  6. “Protective Effect Of Some Modulators In Xenobiotic Hepatotoxicity” Cristina Tanase, E. Codorean, Daria Mihalache, C.T.Dragomir 5th Intern. Symp. And Exhib. On Environm. In Central And Eastern Europe,Praga Abstr. 345,2000.
  7. “Vitaminele E Si F, Modulatori Ai Nivelului Colesterolului Tisular La Sobolani Batrani” Daria Mihalache, A. Costache, V. Preoteasa, C.T.Dragomir Al 31-Lea Simp. Nat. De Morfol. Norm. Si Patol. ,Bucuresti, 2000
  8. “Correlation Between Serum Cholesterol Level And Dna Biosynthesis In Liver Cells” Daria Mihalache, V.Preoteasa, C.T.Dragomir 12th Balkan Biochem. Biophys. Days, Bucuresti, Abstr. 32, 2001
  9. “Effect Of Radioprotective Agent On Chromatin Radiolysis” V. Preoteasa, A. Costache, Daria Mihalache, Irina Radulescu 12th Balkan. Biochem. Biophys. Days, Bucuresti, Abstr. 66, 2001
  10. 10.”Serum Cholesterol Level Influencing The Unscheduled Dna Repair Synthesis In Rat Hepatocyte” Daria Mihalache, A. Carloban, A.Stanculescu, V.Preoteasa Xxivth Intern Congress Of The Intern. Acad. Of Pathology, Abstr. 17651, Amsterdam, 2002.

Lucrări publicate

  1. “On the nature of the forces acting between myofilaments in resting state and under contraction” Dragomir C.T. J.Theor.Biol., 1970, 27, 343
  2. ” Zone melting as a model for active transport across the cell membrane” Dragomir C.T. J.Theor. Biol. 1971, 31, 453
  3. “Contraction of the vascular muscle tissue: does it generate constriction or dilatation?” Dragomir C.T., Daria Ungureanu Physiol. Chem. Phys. 1974, 26, 35-38
  4. ” Deuterium oxide effects upon three parameters characterizing the activity of glycerole-extracted muscle: phosphate release, ATP-induced shortening and 22 Na+ distribution” Dragomir C.T., Margineanu, I., Ungureanu, Daria, Barbier Anca, Alexianu, D., Physiol. Chem. Physics, 12, 69, 1980
  5. ” Influence of thyroid state on the contraction properties of ageing myocardum” Botea S., Dragomir C.T., J.Muscle Res. & Cell Motility, 14, 2 238, 1993.
  6. “The action of anticancer drugs thiotepa and lomustine and of E and A vitamins on tumor chromatin analysed by thermal transition, fluorescence methods and 1H NMR spectroscopy” Liliana Radu, Preoteasa V., Lenghel Z. J. Molec. Structure, Elsv. Publish. Amsterdam, 348, 29-32, 1995
  7. “Radiation protection of chromatin using vit D3 and estradion hormone” Liliana Radu, Preoteasa V., Lenghel Z., Constantinescu B. Environm. Contamination, 569-571, 1996
  8. “Fluorescence lifetime, precision calorimetry and fluorescence energy transfer measurements in the study of normal and tumoral chromatine Liliana Radu, Preoteasa V, Radulescu Irina, Radu S. J. Molec. Structure, 408/409, 191-195, 1997
  9. “Spin-spin relaxation times in myocardial hypertrophy induced by endocrine agents in rat” Burtea Carmen, Gatina, Ruxandra, Mardare Mihaela, Dragomir C.T. Magma 1998, 7, 184-198
  10. “Effect of thyroxine on the hepatocyte nucleus of normal Wistar ratafter the treatment with cytostatic drugs; radioisotopic aspects” Daria Mihalache, Cornelia Geormaneanu, Liana Constantiniu, Adiana Costache, Z. Lenghel Libri Oncologici 24, 67-70, 1995
  11. “Precocious signals detected by 1H-NMR in rat liver exposed to oncogenic stress, interfering with fat-soluble vitamins D3 and E”. Carmen Burtea, Daria Mihalache, Brandusa Ungureanu Libri Oncologici 26, 19-24, 1997
  12. ” Cellular water alterations in rat liver exposed to oncogenic stress. A relaxometric study” Mihalache D., Burtea C., Ungureanu B., Mateescu C. Magma, 1997, suppl. To vol. V, nr II, p.153.
  13. ” Implicatiile colesterolului in cancer’ Daria Mihalache Medicina Moderna, Vi, 11,470-474,1999
  14. 15 ‘Incidenta micronucleatiei in meduva femurala de sobolan la utilizarea pesticidului Gliphosate th.95″ Daria Mihalache, Al.Alexandri Sanatatea plantelor 2001 nr 11.
  15. “Simultaneous investigations of the rat serum and liver response in an acute toxic substance exposure” E. Codorean,G. Filipescu, C.Tanase, D.Mihalache, D. Laky Morphol.Embriol.XXXVII,3-4,143-152,1991
  16. “Chemical Carcinogenesis as a factor altering the tissue ability to bind hormones. Benzo(a)pyrene – insulin interelationships”. C.T.Dragomir, S. Botea, D. Mihalache, M.Mocanu Romanian. J. of Endocrinol. 31,63-69,1993
  17. “Vitamin D3 a possible nuclear protector in normal hepatic and medillar tissue in white Wistar rats, treated with cytostatics. Radioisotopic and cytogenetic aspects” D. Mihalache, L.Georgian, C. Geormaneanu, A. Costache, Z. Lenghel Romanian J. of Endocrinol. 31, 141-148, 1993
  18. ” A possible correlation between unscheduled DNA repair and cholesterolemia in Wistar rat, modulated by vitamin E ” Daria Mihalache, V. Preoteasa, Aura Carloban, Alexandra Stanculescu, C.T.Dragomir, Rom.Arch.Microbiol.Immunol., T 60, no.4,pp 349-358, dec. 2001.
  19. “Effects of combined Selenium and Vitamin E administration on DNA in Walker tumor bearing Wistar rat exposed to cytostatic acute treatment” D. Mihalache, V. Preoteasa, V. Barca, Proc of the Free Papers of 2nd Intercontinental Congress of Pathology, Iguassu Falls, Brazil, june 9-13, Monduzzi Editore – Internat. Proc. Div.CD ROM 2004.